| 產品名稱： | 運動甲烷微菌培養基 |
|---|---|
| 英文名稱: | Methanomicrobium mobile Medium |
| 培養基類型: | 營養培養基 |
| 級別: | AR級 |
| 品牌： | ELITE-MEDIA |
| 產品目錄號: | M807-01、M807-02 |
| 產品規格: | 5L Kit；10L Kit |
| 保存條件: |
粉末固體：密封，陰涼干燥處保存。 液體：于2-8°C避光保存。 |
| 產品性狀: |
乳白色顆粒性粉末，易結塊。 滅菌后培養基：淡黃色透明液體。 |
| 注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。 |
| 相關產品: |
Wolfes礦物質溶液 Wolfes維生素溶液 |
產品描述：
運動甲烷微菌培養基(Methanomicrobium mobile Medium)用于分離和培養運動甲烷微菌屬細菌。原理：
甲烷微菌屬是短、彎桿菌，直徑0.7μm，長1.5～2μ m，不產芽孢，革蘭氏陰性，能運動，極端嚴格厭氧。甲烷微菌屬最適生長溫度40℃，最適pH 6.1～6.9。能量代謝來源于以H2或甲酸鹽為電子供體還原 CO2為CH4釋放的能量。甲烷微菌不能利用乙酸、甲基胺和甲醇。能夠以氨為唯一氮源，以硫化物或單質硫為硫源，要求瘤胃液中的生長因子(包括乙酸、異丁酸、異戊酸、2-甲基丁酸、色氨酸、吡哆醇、硫胺素、生物素和維生素B12)。模式菌種是運動甲烷微菌(Methanomicrobium mobile)。配方與配制方法
| 瘤胃液（澄清） | 300.0 ml |
| 磷酸氫二鉀 | 0.3 g |
| 磷酸二氫鉀 | 0.3 g |
| 硫酸銨 | 0.3 g |
| 氯化鈉 | 0.6 g |
| 硫酸鎂（七水） | 0.13 g |
| 氯化鈣（二水） | 8.0 mg |
| 1000X Wolfes礦物質溶液 | 1.0 ml |
| 1000X Wolfes維生素溶液 | 1.0 ml |
| 硫酸亞鐵（七水） | 2.0 mg |
| 碳酸氫鈉 | 2.0 g |
| 酵母提取物 | 1.0 g |
| 酪蛋白胨 | 1.0 g |
| 脂肪酸混合物 | 20.0 ml |
| 刃天青 | 1.0 mg |
| L-半胱氨酸鹽酸鹽 | 0.5 g |
| 硫化鈉（九水） | 0.5 g |
| pH 6.5 |
稱取3.641g培養基基礎（不含碳酸氫鈉、半胱氨酸鹽酸鹽、硫化鈉），用680ml去離子水溶解。加入300ml澄清瘤胃液。調節pH至6.5。煮沸5-10s，然后在H2-CO2 (80:20, v/v)條件下冷卻。加入碳酸氫鈉到培養基中。在H2-CO2 (80:20, v/v)條件下分裝到合適的容器中，如分裝20ml到120ml血清瓶中。用丁基橡膠塞封住瓶口。121°C 滅菌15 min。滅菌結束后過夜靜止。
在N2環境下，分別滅菌5%半胱氨酸鹽酸鹽溶液和5%九水硫化鈉溶液。在接種前加入兩種還原劑溶液。向接種后的培養瓶中用H2-CO2 (80:20, v/v)加壓至200kPa。
預先加熱瘤胃內容物121℃滅菌15min。用無菌離心瓶在25,000 x g 離心15min。取上清液。整個過程在無菌條件下進行。調節pH至6.5。
脂肪酸混合物配方:
| 戊酸 | 0.5 g |
| 異戊酸 | 0.5 g |
| a-甲基丁酸 | 0.5 g |
| 異丁酸 | 0.5 g |
| 去離子水 | 20.0 ml |
用5M NaOH 調節pH至7.5。
1000X Wolfes礦物質溶液(Wolfe's Mineral Solution):
向大約500ml蒸餾水中加入氨三乙酸，用KOH調節pH至6.5，以使氨三乙酸完全溶解。用蒸餾水定容至1L。一次性加入其余成分。攪拌至完全溶解。過濾除菌。
1000X Wolfes維生素溶液:
