產品名稱: | 運動吲哚賴氨酸培養基;MIL培養基 |
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英文名稱: | Motility-Indole-Lysine Medium;MIL Medium |
培養基類型: | 鑒別培養基 |
級別: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA |
產品目錄號: | M1131-01、M1131-02、M1131-03 |
產品規格: | 100g、250g、20支/盒 |
產品外觀: | 乳白色至綠黃色均一粉末。 |
顏色與澄清度: | 發紅的紫色透明至半透明凝膠。 |
保存條件: | 密封,2-25度保存。 |
注意事項: | 避免呼入和皮膚接觸。 |
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產品描述:
運動吲哚賴氨酸培養基(Motility-Indole-Lysine Medium)簡稱MIL培養基(MIL Medium),基于運動能力、賴氨酸脫羧酶、賴氨酸脫氨酶和吲哚生成能力,輔助鑒別腸桿菌科成員。MIL培養基根據Reller和Merrett描述的配方配制,是一種非常有用的腸桿菌科鑒別培養基,因為只用1管培養物就可提供四種鑒別反應。MIL培養基推薦與三糖鐵瓊脂(TSI)和尿素瓊脂(Urea Agar)一道使用,用于初步鑒定糞便樣本中的腸桿菌科成員。
原理:
動物組織消化物和酪蛋白水解物是N源、C源、氨基酸和維生素來源。葡萄糖是能量來源。少量的瓊脂用于沿著穿刺線展示運動能力。可運動微生物可從穿刺線向外擴張,而非運動微生物則僅沿著穿刺線生長。溴甲酚紫是酸堿指示劑。當接種的是葡萄糖發酵菌時,產生的酸使培養基pH降低,使培養基中的指示劑由紫色變黃色。酸性pH刺激脫羧酶活性。具有特異性脫羧酶的微生物降解培養基中的氨基酸,產生對應的胺。賴氨酸脫羧產生尸胺。胺的產生使pH升高,造成培養基底部又轉變為紫色。由于培養基上部分氧分壓高,仍然維持酸性。如果測試的微生物不具有指定的脫羧酶,培養基的整體都保持酸性(黃色)或者僅在頂部顯紫色或紅色。賴氨酸脫氨在培養基的上部分產生顏色變化。在培養基頂部1厘米處賴氨酸氧化脫氨產生的化合物與檸檬酸鐵銨反應產生一種酒紅色或紅棕色,培養基底部扔保持酸性。該反應僅在賴氨酸脫羧酶不存在的情況下才能被檢測到,變形桿菌、摩根(氏)菌、普羅威登斯菌就是這種情況。具有色氨酸酶的微生物降解色氨酸產生吲哚。酪蛋白胨中含有高濃度的色氨酸。通過向瓊脂表面滴加Kovacs試劑來檢測吲哚,反應產生一種紅色絡合物。
配方與配制方法:
成分 | g/L |
動物組織胃酶消化物 | 10.00 |
酪蛋白水解物 | 10.00 |
酵母提取物 | 3.000 |
L-賴氨酸鹽酸鹽 | 10.00 |
D-葡萄糖 | 1.00 |
檸檬酸鐵銨 | 0.50 |
溴甲酚紫 | 0.02 |
瓊脂 | 2.00 |
Final pH 6.6±0.2 ( 25°C) |
配制方法:
用1000 ml去離子水重懸36.52 g MIL培養基。
加熱至沸騰,使培養基完全溶解。
分裝5ml到試管中。
121 °C高溫蒸汽滅菌15min。
冷卻過程中直立放置試管。
實驗方法:
穿刺接種,37°C培養18-24 h。運動力、賴氨酸脫氨酶、賴氨酸脫羧酶反應先讀取,再檢測吲哚反應。因為加入Kovacs試劑使得培養基顏色變黃,會使賴氨酸脫羧酶陽性反應被誤讀為陰性。35-37°C培養18-24 h后培養物特征如下:
接種微生物 | 運動力 | 吲哚產生 | 賴氨酸脫氨酶 | 賴氨酸脫羧酶 |
Enterobacter aerogenes ATCC13048 | + | - | - | +,紫色 |
Escherichia coli ATCC25922 | + | + | - | +,紫色 |
Klebsiella pneumoniae ATCC13883 | - | 偶爾反應 | - | +,紫色 |
Proteus mirabilis ATCC25933 | + | - | +,頂部紅棕色 | - |
Proteus vulgaris ATCC13315 | + | + | +,頂部紅棕色 | - |
Salmonella Enteritidis ATCC13076 | + | - | - | +,紫色 |
Shigella flexneri ATCC12022 | - | 偶爾反應 | - | - |