| 產品名稱： | 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂；VRBA培養基；VRB瓊脂培養基 |
|---|---|
| 英文名稱： | Violet Red Bile Agar；VRBA；VRB Agar |
| 培養基類型： | 選擇性培養基 |
| 級別： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA |
| 產品目錄號： | M736-01、M736-02 |
| 產品規格： | 250g、500g |
| 產品外觀： | 麥秸色至粉色均一粉末。 |
| 顏色與澄清度： | 紫色凝膠。 |
| 保存條件： | 密封，2-25°C保存。 |
| 注意事項： | 本產中含有刺激性成分。避免攝入、呼入和皮膚接觸。 |
| 相關產品： | VRBGA培養基 |
VRBA培養基產品描述：
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(Violet Red Bile Agar)簡稱VRBA培養基，是選擇性固體培養基，被APHA推薦用于 檢測和計數奶制品和食品中的乳糖發酵型大腸菌群，尤其是產氣大腸桿菌。也用于牛奶和奶制品的微生物學 分析。本培養基采用《細菌學分析手冊》和ISO推薦配方。
VRBA培養基原理：
蛋白胨和酵母提取物提供氮、硫、碳、維生素和礦物質。培養基中的膽鹽和結晶紫作為大部分革蘭氏陽性菌 尤其是葡萄球菌抑制劑。在高于42°C厭氧條件下培養，可以抑制其它革蘭氏陰性菌的生長。中性紅是酸堿指 示劑，變色范圍pH 6.8(紅)～8.0(黃)。乳糖作為可發酵的碳源。大腸菌群發酵乳糖產酸，使得培養基pH降 低。乳糖發酵型微生物形成粉色至紅色菌落，一般在菌落周圍形成一圈紅色膽鹽沉降帶。非乳糖發酵型微生 物則產生無色菌落。結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養基中膽鹽含量低，因此實驗結果不僅限于腸道菌。結晶紫中性紅膽鹽瓊脂配方與配制方法：
| 成分 | g/L |
| 明膠蛋白胨 | 7.0 |
| 酵母提取物 | 3.0 |
| 氯化鈉 | 5.0 |
| 乳糖 | 10.0 |
| 膽鹽或膽鹽3號 | 1.5 |
| 中性紅 | 0.03 |
| 結晶紫 | 0.002 |
| 瓊脂 | 12.0 |
| 終溶液pH | 7.4± 0.2 |
配制方法：
1. 稱取38.5g本產品，用 1000ml去離子水浸泡10min。徹底混勻后，調節pH至pH 7.4±0.2。
2. 不斷攪拌加熱，煮沸2min。可選擇121°C高溫蒸汽滅菌15MIN，但會降低受傷菌的回收率。
3. 冷卻至45°C后，接種，混勻倒入無菌100mm培養皿，每個培養皿倒入15-20mL培養基。
4. 待培養基凝固后，倒入3-4ml瓊脂，形成一層上層瓊脂，以免有菌落在培養基表面生長和蔓延。
VRBA培養基實驗方法：
Spread Plate Method:1. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
2. Aseptically inoculate agar surface with 0.1ml of well mixed diluted sample.
3. Spread the dilution evenly over the surface of the medium.
4. Using a sterile spreader device, distribute the inoculum evenly over the agar surface.
5. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35oC.
Pour Plate Method:
1. Melt agar by placing in a boiling waterbath until liquified.
2. Cool media to 45-50oC. Maintain in a 45-50o waterbath until ready to pour.
3. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
4. Place a 1ml inoculation into a sterile petri plate.
5. Aseptically pour approximately 18ml of the cooled media (45-50oC.) over the inoculum. Carefully swirl the plate to mix the inoculum evenly.
Note: After autoclaving, do not heat media longer than 3 hours at 45-50oC. Sterile solidified medium can only be remelted once.
6. Allow to solidify.
7. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35oC.
VRBA培養基結果與分析：
乳糖發酵型微生物，包括大腸菌群，產生粉色至紅色菌落，一般在菌落四周有一圈紅色的膽鹽沉降帶。在表面生長的E.coli菌落邊緣完整，在培養基內部生長的菌落則呈凸鏡狀。
某些腸球菌也可能生長，產生針尖大小的枚紅色菌落。
非乳糖發酵型微生物形成無色菌落。