| 出品公司: | Promega |
|---|---|
| 載體名稱: | PinPoint Xa-1 |
| 質粒類型: | 大腸桿菌表達載體；蛋白純化 |
| 表達水平: | 高 |
| 啟動子: | Tac |
| 克隆方法: | 多克隆位點，限制性內切酶 |
| 載體大小: | 3331 bp |
| 5' 測序引物及序列: | PinPoint-F: cgtgacgcggtgcagggcg |
| 3' 測序引物及序列: | SP6: ATTTAGGTGACACTATAG |
| 載體標簽: | N-Biotin，N-Factor Xa |
| 載體抗性: | 氨芐 |
| 備注: | 主要用于生物素標記蛋白生產和純化。 |
| 產品目錄號: | V2031 |
| 穩定性: | 瞬表達 |
| 組成型: | 組成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
買家導航
PinPoint Xa-1載體質粒基本信息
PinPoint Xa-1質粒圖譜載體圖譜和PinPoint Xa-1載體序列質粒序列多克隆位點信息
PinPoint Xa-1質粒載體簡介
PinPoint Xa 蛋白純化系統用來生產和純化在體內連接了生物素的融合蛋白質。在一個載體上，將編碼需要純化蛋白質的DNA序列克隆在載體上的一個編碼體內添加生物素的短肽序列的下游。連接生物素的融合蛋白在大腸桿菌內生成，然后用SoftLink軟釋放抗生物素蛋白樹脂親和純化。這個樹脂是專利技術，可將蛋白質以非變性形式洗脫出來。PinPoint載體的特點是含有編碼內源蛋白酶因子Xa(發音為Ten a)的蛋白水解位點，使得純化標簽可從天然蛋白上分離。載體還帶有方便得多克隆區域，便于構建融合蛋白。
系統的幾個載體含有所有可能的有義讀碼框，還含有連接著生物素的樹脂、一個純化柱以及生物素，PinPoint Xa對照載體含有氯素酶轉乙酰基酶（CAT）基因，作為監控蛋白表達、純化和加工條件的手段。在這個系統中，每升培養物一般產生1-5 mg蛋白。
特點
● 胞內添加生物素標簽：用于純化融合蛋白；得到的許多蛋白質是可溶的。
● 易于使用：可以通過柱子，也可以批量用SoftLink樹脂純化生物素標簽蛋白質。
● 便于檢測：鏈霉親和素堿性磷酸酶可用于檢測生物素標簽的融合蛋白質，以假-Western方式，監控純化過程。
● 靈活：所有讀碼框都有相應的PinPoint載體。
● 溫和釋放條件：SoftLink樹脂允許在非變性條件下釋放融合蛋白質。
● tac啟動子：可以嚴格調控表達。
應用
● 純化毫克數量的表達蛋白。
● 生產新穎的生物試劑。
● 與TetraLink 樹脂同用可以制造親和柱。
PinPoint Xa-1質粒序列載體序列
LOCUS PinPoint\Xa-1 3331 bp DNA circular SYN 26-FEB-1996
DEFINITION Cloning vector PinPoint Xa-1, protein expression vector,
complete sequence.
ACCESSION U47626
NID g1200490
KEYWORDS .
SOURCE Cloning vector PinPoint Xa-1.
ORGANISM Cloning vector PinPoint Xa-1
artificial sequence; cloning vectors.
REFERENCE 1 (bases 1 to 3331)
AUTHORS Brady,M.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (30-JAN-1996) Melinda Brady, R&D, Promega Corporation,
5445 East Cheryl Parkway, Madison, WI 53711, USA
COMMENT
NCBI gi: 1200490
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3331
/organism="Cloning vector PinPoint Xa-1"
CDS 1..>386
/label="Biotin purification tag; NCBI gi: 1200491"
/codon_start=1
/transl_table=11
/db_xref="PID:g1200491"
misc_feature 262..264
/label="biotinylated lysine codon; Biotin purification
tag"
primer_bind 325..343
/label="PinPoint(TM) sequencing primer binding site"
misc_feature 379..390
/label="Factor Xa protease recognition site"
misc_feature 387..441
/label="multiple cloning site"
promoter 446..468
/label="SP6 RNA polymerase promoter"
primer_bind 451..469
/label="SP6 sequencing primer binding site"
CDS 919..1779
/gene="ampR"
/label="NCBI gi: 1200492"
/codon_start=1
/function="ampicillin resistance"
/transl_table=11
/product="beta-lactamase"
/db_xref="PID:g1200492"
promoter 2796..2818
/label="T7 RNA polymerase promoter"
promoter 3202..3282
/label="tac promoter"
BASE COUNT 811 a 854 c 885 g 781 t
ORIGIN
1 atgaaactga aggtaacagt caacggcact gcgtatgacg ttgacgttga cgtcgacaag
61 tcacacgaaa acccgatggg caccatcctg ttcggcggcg gcaccggcgg cgcgccggca
121 ccggcagcag gtggcgcagg cgccggtaag gccggagagg gcgagattcc cgctccgctg
181 gccggcaccg tctccaagat cctcgtgaag gagggtgaca cggtcaaggc tggtcagacc
241 gtgctcgttc tcgaggccat gaagatggag accgagatca acgctcccac cgacggcaag
301 gtcgagaagg tcctggtcaa ggagcgtgac gcggtgcagg gcggtcaggg tctcatcaag
361 atcggggatc tcgagctcat cgaaggtcgc gaagcttcag ctgggatccg gtaccgatat
421 cagatctccc ggggcggccg cgatctggtt ctatagtgtc acctaaatcg tatgtgtatg
481 atacataagg ttatgtatta attgtagccg cgttctaacg acaatatgtc catatggtgc
541 actctcagta caatctgctc tgatgccgca tagttaagcc agccccgaca cccgccaaca
601 cccgctgacg cgccctgacg ggcttgtctg ctcccggcat ccgcttacag acaagctgtg
661 accgtctccg ggagctgcat gtgtcagagg ttttcaccgt catcaccgaa acgcgcgaga
721 cgaaagggcc tcgtgatacg cctattttta taggttaatg tcatgataat aatggtttct
781 tagacgtcag gtggcacttt tcggggaaat gtgcgcggaa cccctatttg tttatttttc
841 taaatacatt caaatatgta tccgctcatg agacaataac cctgataaat gcttcaataa
901 tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa catttccgtg tcgcccttat tccctttttt
961 gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct
1021 gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc
1081 cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta
1141 tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac
1201 tattctcaga atgacttggt tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc
1261 atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac tgcggccaac
1321 ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca caacatgggg
1381 gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa ccggagctga atgaagccat accaaacgac
1441 gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc
1501 gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt
1561 gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt ttattgctga taaatctgga
1621 gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt gcagcactgg ggccagatgg taagccctcc
1681 cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt caggcaacta tggatgaacg aaatagacag
1741 atcgctgaga taggtgcctc actgattaag cattggtaac tgtcagacca agtttactca
1801 tatatacttt agattgattt aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc
1861 ctttttgata atctcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca
1921 gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc
1981 tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta
2041 ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt
2101 ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc
2161 gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg
2221 ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg
2281 tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag
2341 cattgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc
2401 agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat
2461 agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg
2521 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc
2581 tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt
2641 accgcctttg agtgagctga taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca
2701 gtgagcgagg aagcggaaga gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg
2761 attcattaat gcaggttaac ctggcttatc gaaattaata cgactcacta tagggagacc
2821 ggcctcgagc agcaaggaga tggcgcccaa cagtcccccg gccacggggc ctgccaccat
2881 acccacgccg aaacaagcgc tcatgagccc gaagtggcga gcccgatctt ccccatcggt
2941 gatgtcggcg atataggcgc cagcaaccgc acctgtggcg ccggtgatgc cggccacgat
3001 gcgtccggcg tagaggatcg atccgggctt atcgactgca cggtgcacca atgcttctgg
3061 cgtcaggcag ccatcggaag ctgtggtatg gctgtgcagg tcgtaaatca ctgcataatt
3121 cgtgtcgctc aaggcgcact cccgttctgg ataatgtttt ttgcgccgac atcataacgg
3181 ttctggcaaa tattctgaaa tgagctgttg acaattaatc atcggctcgt ataatgtgtg
3241 gaattgtgag cggataacaa tttcacacag gaaacagaat tcccagcttg gctgcagaac
3301 cattccattc gttgatccgg gagtaactca c
//
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PinPoint Xa-1質粒載體應用舉例
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