| 產品名稱： | 精氨酸葡萄糖斜面；AGS培養基 |
|---|---|
| 英文名稱： | Arginine-Glucose Slant；AGS |
| 培養基類型： | 鑒別培養基 |
| 級別： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA（艾禮培養基） |
| 產品目錄號： | M745-01、M745-02、M745-03 |
| 產品規格： | 100g、250g、20 tubes/pack |
| 產品外觀： | 乳白色至黃色均一粉末。 |
| 滅菌后顏色與澄清度： | 綠色半透明凝膠。 |
| 保存條件： | 密封，2-25°C保存。 |
| 注意事項： | 避免攝入、吸入、皮膚接觸。 |
| 相關產品： | -- |
產品描述：
精氨酸葡萄糖斜面（Arginine-Glucose Slant）簡稱AGS培養基，弧菌鑒別培養基。本產品采用FDA和《細菌學鑒定手冊》規定配方。
工作原理
霍亂弧菌和擬態弧菌是精氨酸脫氫酶陰性菌，發酵葡萄糖產酸不產氣，不產硫化氫。霍亂弧菌和擬態弧菌培養物表現出堿性斜面（紫色）和酸性管底（黃色）。溴甲酚紫是酸堿指示劑，變色范圍pH5.2(黃色)～pH6.8(紫色)。檸檬酸鐵銨和硫代硫酸鈉是硫化氫指示系統，如果待測菌產生硫化氫，與指示劑反應產生黑色沉淀，使培養基變黑。用途：
AGS培養基弧菌的鑒別和驗證。配方與配制方法
| 成分 | g/L |
|---|---|
| 蛋白胨 | 5.0 |
| 酵母提取物 | 3.0 |
| 胰蛋白胨 | 10.0 |
| 氯化鈉 | 20.0 |
| 葡萄糖 | 1.0 |
| L-精氨酸鹽酸鹽 | 5.0 |
| 檸檬酸鐵銨 | 0.5 |
| 硫代硫酸鈉 | 0.3 |
| 溴甲酚紫 | 0.02 |
| 瓊脂 | 13.5 |
| pH | 6.8-7.0 |
配制方法：
1. 稱取58.3g本產品，加入1000ml去離子水浸泡10min。
2. 加熱溶解。分裝5ml到 13 × 100 mm試管中。
3. 121°C滅菌10-12min。傾斜放置試管，制作斜面。
實驗方法
篩選和驗證1. 精氨酸葡萄糖斜面。每個疑似T1N1 的培養物采用劃線法和穿刺法接種到AGS上。試管蓋不要蓋嚴。35° ±2°C過夜培養。霍亂弧菌和擬態弧菌培養物表現出堿性斜面（紫色）和酸性管底（黃色），精氨酸不被水解。不產氣不產硫化氫。
2. 耐鹽性。將T1N1 培養物小量接種到T1N0 和T1N3液體培養基中。試管35° ±2°C過夜培養。霍亂弧菌和擬態弧菌能夠在缺少氯化鈉的條件下生長。
3. 線狀試驗。該試驗是很有用的初步鑒定方法，鑒于所有的霍亂弧菌菌株均為陽性。從T1N1 瓊脂平板上挑去一個大菌落，在載玻片上用一滴0.5%的脫氧膽酸鈉溶液分散。在1min內細胞裂解，液體由渾濁變透明。接種環從載玻片上抬起時可見線狀的DNA。
4. 氧化反應。用鉑絲（不能用鉻絲）或木質敷藥棒轉移T1N1 培養基上過夜培養的菌落到濾紙上，加上一滴氧化酶試劑（1%N,N,N,N-四甲基苯二胺）。10秒鐘內顯深紫色即為陽性結果。也可以向T1N1 瓊脂平板上滴加氧化酶試劑。霍亂弧菌和擬態弧菌都是氧化酶陽性。
5. 血清凝集試驗。對于通過線狀試驗的疑似霍亂弧菌培養物，使用菌體抗原（O抗原）能夠給出重要的流行病學證據。有兩種重要的血清型，血清組O1（Ogawa和Inaba）和血清組O139是已知的人類治病原。O1血清組里的兩種血清型既存在于典型霍亂弧菌也存在于El Tor生物型中。而O139血清型則僅見于El Tor生物型中。
a. 在玻璃培養皿內或載玻片上，標出三個區域。每個區域加一滴0.85%鹽水，用接種環或接種針，在鹽水中分散T1N1 培養物。如此重復。檢測凝集現象。
b. 加入一滴多價霍亂弧菌O1抗血清到一個區域的菌懸液中，用接種環或接種針混勻。第三個區域加一滴O139抗血清。
c. 傾斜培養皿（載玻片）前后晃動菌懸液1min，在黑色背景下觀察結果。陽性反應表現為迅速地、明顯地凝集現象。
d. 上一步驟結果陽性的培養物，分別做Ogawa抗血清檢測和Inaba抗血清檢測。