| 培養基名稱 |
TCBS瓊脂、TCBS弧菌選擇瓊脂、弧菌檢測瓊脂、霍亂弧菌TCBS培養基、TCBS弧菌檢測培養基、TCBS瓊脂培養基 TCBS平板、TCBS弧菌檢測試劑盒 弧菌培養基、弧菌顯色培養基、水產養殖用弧菌培養基、弧菌培養基TCBS |
|---|---|
| 英文名稱: | Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar\ TCBS Agar\ Vibrio Selective Agar |
| 培養基類型: | 選擇性培養基 |
| 產品目錄號: | M746 |
| 產品規格: | 250g 、500g、TCBS平板（20個/包）、TCBS平板（100個/箱）、TCBS弧菌試劑盒（含1個9 CM平板、一次性滴管、一次性涂布棒、一管0.9ml無菌稀釋液） |
| 保存條件: | 密封，避光，2-30度，干燥處保存。 |
| 產品性狀: | 麥秸色-綠色粉末/綠色凝膠 |
| 注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。配制時在通風櫥中進行，戴口罩、手套、護目鏡。 |
| 相關產品: | 無菌TCBS弧菌檢測稀釋液（0.9mlx10價格是5元，TCBS培養基稀釋液請聯系客服） |
TCBS培養基圖片
產品描述：
TCBS瓊脂培養基（Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar）簡稱弧菌選擇瓊脂, 弧菌檢測培養基，弧菌檢測瓊脂。TCBS用于分離臨床樣本中的霍亂弧菌和副溶血弧菌。TCBS培養基也用于水產養殖（如南美白對蝦、海水魚）溶藻弧菌、副溶血弧菌的檢測，是水產養殖用弧菌培養基。本產品采用美國FDA和《細菌學鑒定手冊》規定配方。
工作原理
堿性條件能夠在一定程度上抑制腸道菌的生長，也能促進霍亂弧菌的生長，霍亂弧菌對酸性條件敏感。牛膽汁和膽鹽減慢腸道球菌生長，抑制革蘭氏陽性菌。該培養基可以在24h內有效抑制所有腸桿菌的生長。蔗糖發酵產酸使培養基pH呈酸性，使得溴甲酚藍由藍色變黃色。TCBS培養基指示劑是溴甲酚藍和和百里酚藍，這兩個化合物是酸堿指示劑。溴甲酚藍是酸堿指示劑，pH變色范圍3.8(黃色)～5.4(藍綠色)。有兩種變色范圍：（1）酸范圍為pH1.2～2.8，由黃色變紅色；（2）堿范圍為pH值8.0～9.6，由黃變藍色。
檸檬酸鐵銨和硫代硫酸鈉是硫化氫指示系統，如果待測菌產生硫化氫，與指示劑反應產生黑色沉淀，使培養基變黑。
氯化鈉提供嗜鹽弧菌的最佳生長和代謝條件。酵母提取物和蛋白胨提供氮源、維生素和氨基酸。
用途：
TCBS瓊脂培養基用于從魚、海鮮和動物源性生物樣本中分離霍亂弧菌和其它腸道致病性弧菌，特別是副溶血弧菌。TCBS瓊脂培養基也用于控制棘冠海星的爆發。
弧菌在咸淡水和海水養殖中是最常見的一種病原菌，包括鰻弧菌，創傷弧菌，哈維氏弧菌和河流弧菌等。蝦病的發生前兆就是弧菌數量增多。我公司專門開發養殖TCBS培養基檢測水體中弧菌的數量的試劑盒，就像檢測水體溶氧和亞硝酸鹽一樣可以提前預知蝦病是否馬上會來。隨時監控水體或養殖品種的弧菌數量是否超標。
TCBS瓊脂培養基適用于水產養殖（如南美白對蝦、海水魚）溶藻弧菌、副溶血弧菌的檢測，為您的養殖提供可參考的數據，幫助您預防養殖細菌性病害。本公司出品的TCBS瓊脂培養基平板均為一次性消毒包裝隨拿隨用。
可用于蝦苗體內弧菌的檢測、水體弧菌的檢測。
配方與配制方法
| TCBS培養基成分： | 含量/L |
|---|---|
| 細菌學蛋白胨 | 10.0 g |
| 酵母提取物 | 5.0 g |
| 蔗糖 | 20.0 g |
| 硫代硫酸鈉 | 10.0 g |
| 檸檬酸鈉 | 10.0 g |
| 膽酸鈉 | 3.0 g |
| 牛膽汁 | 5.0 g |
| 氯化鈉 | 10.0 g |
| 檸檬酸鐵 | 1.0 g |
| 溴麝香草酚藍 | 0.04 g |
| 百里酚藍 | 0.04 g |
| 瓊脂 | 15.0 g |
| pH | 8.6 ± 0.2 |
配制方法如下：
1. 稱取89g本培養基，加1L去離子水浸泡10 min。2. 瓶口用紗布封蓋，在火焰上方邊搖動邊加熱至全部溶解。不要用滅菌鍋滅菌。在進行TCBS培養基配制時，TCBS是堿性pH8.6左右。
3. 待冷卻至50°C時，倒入無菌培養皿中。
4. 制作好的TCBS平板是綠色的。
實驗方法
35°C度過夜培養即可。在分離水中的弧菌時，需要采用20-30°C培養。結果與分析
由于弧菌的營養需求多樣性，某些菌株可能在TCBS培養基上生長較差或者不生長。在初步分離時，副溶血弧菌可能與 嗜水氣單胞菌、類志賀毗鄰單胞和假單胞菌相似。
蔗糖發酵型變形桿菌會產生黃色菌落，與弧菌相似。
TCBS培養基不能用于弧菌的氧化酶試驗。
TCBS平板霍亂菌鑒別時，幾株霍亂弧菌由于蔗糖發酵延遲，可能產生綠色或無色菌落。
在回收病原菌時，TCBS瓊脂與非選擇性培養基結合使用能夠獲得最佳回收率。
與月桂基硫酸鹽亞碲酸鹽瓊脂（Lauryl Sulphate Tellurite Agar）相比，TCBS培養基更有優勢，因為不需要添加補充劑或血液，在抑制非弧菌生長的同時促進弧菌的生長。
TCBS培養基的鑒別菌落特征/弧菌培養基上菌落特點 TCBS培養基變色和TCBS培養基指示劑菌種識別詳細說明，TCBS平板各種菌落情況如下： 菌種 菌落特征 霍亂弧菌 黃色，扁平，直徑2-3mm 溶藻弧菌 黃色，直徑3-5mm 麥奇尼科夫弧菌 黃色，直徑3-4mm 創傷弧菌 黃色或透明菌落 河流弧菌 黃色，直徑2-3mm 副溶血弧菌 藍綠色，直徑3-5mm 假單胞菌 藍綠色，直徑1mm 氣單孢菌屬 藍色菌落 腸桿菌 透明，直徑1mm 擬態弧菌 藍綠色，直徑2-3mm 腸球菌 黃色，直徑1mm 變形桿菌 黃色或綠色，直徑1mm TCBS平板菌落為黑褐色的情況一般就是指菌落為藍綠色或者綠色，這是由于在綠色平板上時，藍綠色和綠色看起來就有點像黑褐色。
TCBS弧菌檢測培養基平板使用說明書（弧菌培養皿的使用方法）
1. 原理：弧菌顯色試劑只適合弧菌科菌類的顯色觀察，定量的被測試的水樣均勻的涂抹在制備好的試劑板上一定的時間后，通過弧菌產生的酸堿顯示出明顯可見的色斑，經過計數，計算出水體中每毫升弧菌的數量。
2. 儲存（十分重要）：短期常溫儲存，長期放4度儲存，千萬不可以冷凍，常溫儲存有效期1個月，4度保存有效期6個月；同時儲存的時候平板需要倒置（有瓊脂的那個面朝天上），防止冷凝水對培養基的污染。
3. 弧菌培養基怎么接種呢，具體操作方法如下：
（1）測試樣操作：移液槍（0.1ml巴氏滴管）取水樣0.1毫升于培養皿的平板（從4度取出后一定要放在室內，恢復到室溫）上，用涂布棒（金屬涂布棒在使用后需要在酒精燈上面燒一下滅菌同時用之前再在酒精燈上面燒一下，一定要等涂布棒冷卻后再涂布操作；或者使用一次性涂布棒）將水樣均勻的涂布于平板上，加蓋，平放1~2個小時后倒置。下面標準的操作：用恒溫箱在36±1℃培養18-24小時。沒有條件的實驗員進行如下操作：室溫25~37度一天（冷天可用泡沫箱加8~10瓦電珠維持溫度），20~25度2天。
（2）弧菌計數：顯色后的弧菌平板上出現可見的黃色和綠色的色斑，是不同的弧菌特性的顯色特征，通過計數每個平板平均色斑（x），可以計算出水樣中的弧菌數量Y=X×10（個/ml）。
4. 指標和建議：
一般養殖水體中超過1000個/ml弧菌時，就很容易出現大面積的發病，因此將1000個/ml作為警示指標。在合適的溫度和有機質比較豐富的水質中，弧菌數量由500個/ml到1000個/ml通常只需要2天的時間，所以控制弧菌數量應該在500/ml或更低的時候進行。
南美白對蝦在養殖20天后，生長量和投餌量迅速的增加，產生大量的有機廢料，超出了水體自身的凈化能力，給弧菌營造了適宜的營養溫床，使對蝦容易感染弧菌疾病，表現黑，黃鰓，黑斑，紅腳，爛眼，短須，空腸空胃，停食等癥狀，會出現大量的游塘，趴邊和死亡。建議在大面積水族養殖過程中每2到3天檢測弧菌量，當弧菌數量上升至300個/ml時，用蛭弧菌+活水寶處理，能維持弧菌量在較低的水平和較長的周期，每10天左右使用一次，如果超過500個/ml,最好先使用消毒劑，如解毒保底安+紅體白班消，2天后使用蛭弧菌+活水寶，維持水質，嚴格控制弧菌量在1000個/ml以下特別在養殖30天以后，更應該注意弧菌數量的變化，做到防治在先。
TCBS弧菌檢測平板使用說明書
TCBS弧菌檢測平板操作方法
TCBS弧菌檢測培養基平板培養后圖片
TCBS弧菌檢測培養基客戶使用實際效果圖
TCBS平板蝦苗弧菌數檢測實施方法
1、檢測方法
A、用杯子或適當容器，裝100ml純凈水(礦泉水或蒸餾水)，再取約70只蝦苗放入杯子或容器中，洗凈；
B、依蝦苗的大小（以蝦苗大小與數量表格為準）取適量蝦苗放入稀釋液中，用研磨棒研磨至蝦體粉碎（以看不到整塊苗體為標準）；
C、靜置2分鐘，取上清液0.1ml（用吸管取上清液到刻度處），加入第二支稀釋液中，搖均，再取上清液0.1ml至培養基上；
D、用涂菌棒將液體充分均勻的涂抹于培養基上；
E、將培養基放于室溫20~300C靜置培養12~24小時后觀察；
F、觀察時清點培養基上菌落數量，并參照計數方法的采樣數量，計算出蝦苗弧菌數量
2、蝦苗大小與取樣數量，以及弧菌計數方法
4、蝦苗弧菌數安全標準
A、熒光弧菌觀察以12~18小時為準，培養時間超過或不足12~18小時，可能無法觀察到弧菌發光現象；
B、因熒光弧菌發出的熒光很弱，所以應在黑暗、無光的條件下觀察。
注：熒光弧菌為綠色菌落，如觀察無綠色菌落，可不觀察熒光弧菌。