| 產品名稱： | 平板計數瓊脂；平板計數培養基；平板計數瓊脂（標準法）；PCA培養基 |
|---|---|
| 英文名稱： | Plate Count Agar (Standard Methods)；PCA |
| 培養基類型： | 營養培養基 |
| 級別： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA |
| 產品目錄號： | M233-01、M233-02 |
| 產品規格： | 250g、500g、2.5kg |
| 產品外觀： | 麥秸色均一粉末。 |
| 顏色與澄清度： | 淺黃色透明凝膠。 |
| 保存條件： | 密封，2-25度保存。 |
| 注意事項： | 避免呼入和皮膚接觸。 |
| 相關產品： | 牛奶平板計數瓊脂（Milk Plate Count Agar） |
平板計數培養基產品描述：
平板計數瓊脂（Plate Count Agar）簡稱PCA，是非選擇性固體培養基，用于食品、化妝品和飲 用水中微生物計數。本培養基配方采用標準法配方。
平板計數瓊脂培養基用途：
PCA培養基用于檢測食品、奶制品、飲用水、化妝品中微生物含量。既用于標準方法，也用于自動化螺旋板計數法。
平板計數培養基原理：
胰蛋白胨提供有機氮源和游離氨基酸，酵母提取物提供生長因子，葡萄糖作為能量物質。平板計數瓊脂培 養基中的營養成分能夠支持牛奶及飲用水中絕大多數微生物的生長。平板計數瓊脂培養基配方與配制方法（瓊脂培養基的配制步驟）：
平板計數瓊脂怎么配制呢？下面是平板計數瓊脂培養基的配制步驟：| 成分 | g/L |
| 胰蛋白胨 | 5.0 |
| 酵母提取物 | 2.5 |
| 葡萄糖 | 1.0 |
| 瓊脂 | 15.0 |
| pH 7.0± 0.2 |
配制方法：
1. 稱取以上組分，或者直接稱取本公司的平板計數瓊脂培養基23.5g 本品，用1000ml去離子水重懸，加熱攪拌使其全部溶解。
2. 平板計數瓊脂培養基的滅菌溫度是：121°C高溫滅菌15min。
3. 待冷卻至55°C時倒20ml培養基到90mm無菌培養皿中。
4. 對于酵母和霉菌含量高的樣品，則用100mm培養皿，每個培養皿倒入20-25ml培養基。 待瓊脂表面干燥后使用。
平板計數瓊脂多久凝固呢？一般講滅菌過的平板計數瓊脂導入培養皿后，放置30分鐘左右，培養皿中的平板計數瓊脂就會凝固了，細菌計數平板也就制作成功了。
平板計數瓊脂在哪滅菌呢？平板計數瓊脂培養基滅菌條件一般是使用高溫高壓滅菌鍋在121 °C條件下，濕熱滅菌15分鐘，就滅菌成功了！
平板計數瓊脂培養基ph調制pH7.0± 0.2即可，Elite-Media公司出品的平板計數瓊脂培養基一般配置成功后，pH值直接就是7.0左右，可以直接使用，幾乎不用再進行調節了。
生物風出品的平板計數瓊脂培養基，品牌是Elite-Media，產品品質良好，是平板計數瓊脂陸橋等公司同類產品的良好替代品！
平板計數瓊脂使用方法（平板計數法、大腸菌群平板計數法、菌落總數平板計數法）
方法一 菌落計數總數之稀釋倒平板法
此方法是2010年版國家標準 GB 4789.2-2010中的菌落總數計數方法。
3、10倍梯度稀釋樣品液。取樣品溶解液1 ml，加入9ml 無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，吹打均勻，此時的溶液樣品濃度是原始樣品的0.01倍。每次吸取上一個樣品1 ml，加入到9ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，根據這個方法繼續進行樣品的連續梯度稀釋。
4、 選擇2-3個合適的稀釋度，吸取該稀釋度的1 ml稀釋液于無菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。
5、稀釋液移入平皿后，及時將涼至45-50 ℃的瓊脂培養基(可放置于45℃水浴箱保溫) 注入平皿約15-25 mL，并轉動平皿使菌液稀釋液和瓊脂培養基混合均勻。同時將瓊脂
此方法是2010年版國家標準 GB 4789.2-2010中的菌落總數計數方法。
1、稱取平板計數瓊脂23.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，滅菌完成后，將獲得的平板計數瓊脂培養基置于45度水浴中備用。
2、樣品的稀釋及處理。取樣品25g或者25ml，溶解于225ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，然后使得樣品充分溶解和混勻。此時的樣品濃度是稀釋了原樣品10倍。
2、樣品的稀釋及處理。取樣品25g或者25ml，溶解于225ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，然后使得樣品充分溶解和混勻。此時的樣品濃度是稀釋了原樣品10倍。
3、10倍梯度稀釋樣品液。取樣品溶解液1 ml，加入9ml 無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，吹打均勻，此時的溶液樣品濃度是原始樣品的0.01倍。每次吸取上一個樣品1 ml，加入到9ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，根據這個方法繼續進行樣品的連續梯度稀釋。
4、 選擇2-3個合適的稀釋度，吸取該稀釋度的1 ml稀釋液于無菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。
5、稀釋液移入平皿后，及時將涼至45-50 ℃的瓊脂培養基(可放置于45℃水浴箱保溫) 注入平皿約15-25 mL，并轉動平皿使菌液稀釋液和瓊脂培養基混合均勻。同時將瓊脂
培養基傾入加有1 mL無菌生理鹽水或者磷酸鹽緩沖液的滅菌平皿內作空白對照。
5、待瓊脂凝固后，翻轉平板，置36±1℃溫箱內培養48±2h。
6、觀察結果并進行計數。30-300個菌落為合適范圍，出具菌落總數計數報告。
5、待瓊脂凝固后，翻轉平板，置36±1℃溫箱內培養48±2h。
6、觀察結果并進行計數。30-300個菌落為合適范圍，出具菌落總數計數報告。
方法二：菌落總數計數平板涂布法
1、稱取平板計數瓊脂23.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用。
2、待冷卻至55°C時倒20ml培養基到90mm無菌培養皿中，冷卻后成為可以使用的平板計數平板，待表面干燥后使用。對于酵母和霉菌含量高的樣品，則用100mm培養皿，每個培養皿倒入20-25ml培養基。 待瓊脂表面干燥后使用。
2、待冷卻至55°C時倒20ml培養基到90mm無菌培養皿中，冷卻后成為可以使用的平板計數平板，待表面干燥后使用。對于酵母和霉菌含量高的樣品，則用100mm培養皿，每個培養皿倒入20-25ml培養基。 待瓊脂表面干燥后使用。
2、樣品的稀釋及處理。取樣品25g或者25ml，溶解于225ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，然后使得樣品充分溶解和混勻。此時的樣品濃度是稀釋了原樣品10倍。
3、10倍梯度稀釋樣品液。取樣品溶解液1 ml，加入9ml 無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，吹打均勻，此時的溶液樣品濃度是原始樣品的0.01倍。每次吸取上一個樣品1 ml，加入到9ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，根據這個方法繼續進行樣品的連續梯度稀釋。
4、 選擇2-3個合適的稀釋度，吸取該稀釋度的0. 1 ml或者0.2 ml稀釋液于倒好的計數平板中，每個稀釋度做兩個瓊脂平板。
5、使用無菌的玻棒或者其他無菌涂布物品，將稀釋液在平板上涂布均勻。
6、將平板置于36±1℃溫箱內培養48±2h。
7、觀察結果并進行計數。30-300個菌落為合適范圍。出具菌落總數計數報告。
平板計數法、菌落總數計數法的計數方法、規則和報告書寫（大腸菌群平板計數報告、平板菌落計數規則）
平板計數法怎么計數？這個是很多利用平板計數瓊脂做菌落總數計數的技術人員非常關心的問題，具體的平板菌落計數方法如下：
3、10倍梯度稀釋樣品液。取樣品溶解液1 ml，加入9ml 無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，吹打均勻，此時的溶液樣品濃度是原始樣品的0.01倍。每次吸取上一個樣品1 ml，加入到9ml無菌生理鹽水或者無菌磷酸鹽緩沖液中，根據這個方法繼續進行樣品的連續梯度稀釋。
4、 選擇2-3個合適的稀釋度，吸取該稀釋度的0. 1 ml或者0.2 ml稀釋液于倒好的計數平板中，每個稀釋度做兩個瓊脂平板。
5、使用無菌的玻棒或者其他無菌涂布物品，將稀釋液在平板上涂布均勻。
6、將平板置于36±1℃溫箱內培養48±2h。
7、觀察結果并進行計數。30-300個菌落為合適范圍。出具菌落總數計數報告。
平板計數法、菌落總數計數法的計數方法、規則和報告書寫（大腸菌群平板計數報告、平板菌落計數規則）
平板計數法怎么計數？這個是很多利用平板計數瓊脂做菌落總數計數的技術人員非常關心的問題，具體的平板菌落計數方法如下：
1、選取菌落數在30-300CFU之間的無蔓延菌落生長的平板進行計數。
2、有較大片狀生長菌落的平板不宜采用。
3、如果片狀菌落不足平板一半，而另一半平板菌落分布均勻，可計算分布均勻的一半，再乘以2。
4、如果平板上出現菌落間無明顯界限的鏈狀生長時，則每條單鏈作為一個菌落計算。
平板菌落計數法公式使用案例1：
平板菌落計數法的公式使用案例2：
5、菌落數小于100CFU時候，按照“四舍五入”原則修約，以整數報告。
6、菌落數大于等于100CFU時，第三位數字采用“四舍五入”原則修約后，取前兩位數字，后面用0替代位數；也可以使用10的指數的形式來表示，按照“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數字。
7、若所有平板上為蔓延菌落而無法計數，則報告菌落蔓延。
8、若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結果無效。
9、稱重樣品以CFU/g為單位填寫報告，體積取樣以CFU/ml為單位填寫報告。
平板菌落計數法公式和平板菌落計數的CFU計算方法
9、稱重樣品以CFU/g為單位填寫報告，體積取樣以CFU/ml為單位填寫報告。
平板菌落計數法公式和平板菌落計數的CFU計算方法
1、如果只有一個稀釋度平板的菌落數在適宜范圍，則計算該稀釋度兩個平板菌落的平均數，在乘以稀釋倍數，作為每克或者每毫升樣品中菌落總數結果。
2、若有兩個連續稀釋度的平板菌落數均在適宜范圍，則按照以下公式計算：
平板菌落計數法公式使用案例1：
平板菌落計數法的公式使用案例2：
3、如果所有的平板菌落數均大于300，計算最高稀釋度平板的平均菌落數。
4、所有平板菌落數均小于30，計算最低稀釋度平板的平均菌落數。
5、樣品原液和所有稀釋度平板均無菌生長，以小于1乘以最低稀釋倍數計算。
6、所有稀釋度平板菌落數均不在30-300之間，有些小于30，有些大于300，則以最接近30-300的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。
平板菌落計數報告案例
編號 菌落總數 報告方式 單位
1 95.5 96
2 1680 1700或者1.7*102
3 均為蔓延菌落 報告“菌落蔓延” 所有單位均為CFU/g或者CFU/ml，CFU大寫
無法計數
4 空白對照有菌 本次檢測
結果無效
平板計數瓊脂使用方法（平板計數法）英文操作說明
Spread Plate Method:
1. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
2. Aseptically inoculate agar surface with 0.1ml of well mixed diluted sample.
3. Using a sterile spreader device, spread the dilution evenly over the surface of the agar.
4. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2 hours at 35ºC.
Pour Plate Method:
1. Melt agar by placing in a boiling waterbath until liquified.
2. Cool media to 45-50ºC. Maintain in a 45-50º waterbath until ready to pour.
3. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
4. Place a 1ml inoculation into a sterile petri plate.
5. Aseptically pour approximately 18ml of the cooled media (45-50ºC.) over the inoculum. Carefully swirl the plate to mix the inoculum evenly.
Note: After autoclaving, do not heat media longer than three hours at 45-50ºC. Sterile solidified medium can only be remelted once.
6. Allow media to solidify.
7. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2 hours at 35ºC.
Spread Plate Method:
1. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
2. Aseptically inoculate agar surface with 0.1ml of well mixed diluted sample.
3. Using a sterile spreader device, spread the dilution evenly over the surface of the agar.
4. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2 hours at 35ºC.
Pour Plate Method:
1. Melt agar by placing in a boiling waterbath until liquified.
2. Cool media to 45-50ºC. Maintain in a 45-50º waterbath until ready to pour.
3. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
4. Place a 1ml inoculation into a sterile petri plate.
5. Aseptically pour approximately 18ml of the cooled media (45-50ºC.) over the inoculum. Carefully swirl the plate to mix the inoculum evenly.
Note: After autoclaving, do not heat media longer than three hours at 45-50ºC. Sterile solidified medium can only be remelted once.
6. Allow media to solidify.
7. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2 hours at 35ºC.