| 出品公司: | Takara |
|---|---|
| 載體名稱: | pCold IV, pColdIV, pCold-IV |
| 質粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達載體 |
| 表達水平: | 高 |
| 啟動子: | CSPA |
| 克隆方法: | 多克隆位點，限制性內切酶 |
| 載體大小: | 4359 bp |
| 5' 測序引物及序列: | pCold-F: 5'-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3' |
| 3' 測序引物及序列: | pCold-R: 5'-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3' |
| 載體標簽: | / |
| 載體抗性: | Ampicillin 氨芐 |
| 備注: |
溫度誘導，冷休克蛋白表達載體
|
| 產品目錄號: | 3364 |
| 穩定性: | 瞬時表達 Transient |
| 組成型: | 誘導表達 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
買家導航
pCold IV載體 pColdIV質粒基本信息
pCold IV質粒圖譜 pColdIV載體圖譜和pCold IV載體序列 pColdIV質粒序列多克隆位點信息
pCold IV質粒 pColdIV載體簡介
闡明蛋白質的結構和功能是后基因組研究的一個重要課題。高效率的蛋白質表達系統是研究這些課題的不可缺少的基本技術。大腸桿菌作為宿主的表達系統中被廣泛 使用于生產重組蛋白。大腸桿菌表達系統具有良好的優勢,方法簡單，成本低。然而，對于某些基因，蛋白表達很困難，表達的蛋白質不溶。
為了解決這些問題，TAKARA與Masayori Inouye教授（美國新澤西醫學和牙科大學）進行聯合研究，以制定一個高效基于低溫冷休克蛋白基因的大腸桿菌表達載體。pCold DNA系列產品具有上述的優點，并提供了一個重要功能和結構的分析以及其他蛋白質研究領域的工具。
<產品概況和特點>
當培養的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時停止生長大部分的蛋白表達減少，而此時一組蛋白質稱為“冷休克蛋白”被專門誘導表達。
冷休克表達載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動子設計高效率蛋白質表達載體。 CSPA的啟動子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴格控制表達。此外，5'非翻譯區（5'UTR），翻譯增強元件（TEE），His標簽序列，Xa因 子切割位點和多克隆位點（MCS）位于在CSPA啟動子的下游的。由于該產品采用了大腸桿菌的啟動子，大多數大腸桿菌菌株可被用作表達宿主。有四種類型的 pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標簽序列和Factor XA酶切位點。
pCold IV質粒序列 pColdIV載體序列
LOCUS pCold\IV 4359 bp DNA circular SYN 10-AUG-2004
DEFINITION Expression vector pColdIV DNA, complete sequence.
ACCESSION AB186391
VERSION AB186391.1 GI:51090256
KEYWORDS .
SOURCE Expression vector pColdIV
ORGANISM Expression vector pColdIV
other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
//gt12365.cn/
COMMENT VNTAUTHORNAME|gt12365.cn|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4359
/organism="Expression vector pColdIV"
/mol_type="other DNA"
/db_xref="taxon:289232"
/lab_host="Escherichia coli"
/note="expresses an open reading frame directly. This
plasmid is derived from pUC118."
gene 15..464
/gene="cspA"
promoter 15..81
/gene="cspA"
misc_feature 82..121
/gene="cspA"
/note="synthetic lac operator sequence"
5'UTR 122..255
/gene="cspA"
/note="modified cspA 5'UTR"
misc_feature 253..312
/gene="cspA"
/note="MCS = Multiple cloning sites contain the follow
restriction sites: NdeI, SacI, KpnI, XhoI, BamHI, EcoRI,
HindIII, SalI, PstI, XbaI"
3'UTR 320..464
/gene="cspA"
/note="cspA 3'UTR"
misc_feature complement(663..1136)
/note="M13 intergenic region"
gene 1323..2183
/gene="Amp"
CDS 1323..2183
/gene="Amp"
/codon_start=1
/transl_table=11
/product="beta-lactamase"
/protein_id="BAD35140.1"
/db_xref="GI:51090257"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
EIGASLIKHW"
rep_origin 2343..2957
/note="ColE1 origin"
gene complement(3114..4196)
/gene="lacI"
CDS complement(3114..4196)
/gene="lacI"
/codon_start=1
/transl_table=11
/product="lactose operon repressor"
/protein_id="BAD35141.1"
/db_xref="GI:51090258"
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAE
LNYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERS
GVEACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSII
FSHEDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREG
DWSAMSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDT
EDSSCYIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNT
QTASPRALADSLMQLARQVSRLESGQ"
ORIGIN
1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
241 aagaggtaat accatatgga gctcggtacc ctcgagggat ccgaattcaa gcttgtcgac
301 ctgcagtcta gataggtaat ctctgcttaa aagcacagaa tctaagatcc ctgccatttg
361 gcggggattt ttttatttgt tttcaggaaa taaataatcg atcgcgtaat aaaatctatt
421 attatttttg tgaagaataa atttgggtgc aatgagaatg cgcaggccct ttcgtctcgc
481 gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc
541 ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg
601 cgggtgtcgg ggctggctta actatgcggc atcagagcag attgtactga gagtgcacca
661 taaaattgta aacgttaata ttttgttaaa attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc
721 attttttaac caataggccg aaatcggcaa aatcccttat aaatcaaaag aatagcccga
781 gatagggttg agtgttgttc cagtttggaa caagagtcca ctattaaaga acgtggactc
841 caacgtcaaa gggcgaaaaa ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc
901 caaatcaagt tttttggggt cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag
961 cccccgattt agagcttgac ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa
1021 agcgaaagga gcgggcgcta gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac
1081 cacacccgcc gcgcttaatg cgccgctaca gggcgcgtac tatggttgct ttgacgtatg
1141 cggtgtgaaa taccgcacag atgcgtaagg agaaaatacc gcatcaggcg tcaggtggca
1201 cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata cattcaaata
1261 tgtatccgct catgagacaa taaccctgat aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga
1321 gtatgagtat tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc
1381 ctgtttttgc tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg
1441 cacgagtggg ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc
1501 ccgaagaacg ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat
1561 cccgtattga cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct cagaatgact
1621 tggttgagta ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat
1681 tatgcagtgc tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt ctgacaacga
1741 tcggaggacc gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc
1801 ttgatcgttg ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga
1861 tgcctgtagc aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag
1921 cttcccggca acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc
1981 gctcggccct tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt
2041 ctcgcggtat cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct
2101 acacgacggg gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg
2161 cctcactgat taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg
2221 atttaaaact tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca
2281 tgaccaaaat cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga
2341 tcaaaggatc ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa
2401 aaccaccgct accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga
2461 aggtaactgg cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt tcttctagtg tagccgtagt
2521 taggccacca cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt
2581 taccagtggc tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat
2641 agttaccgga taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct
2701 tggagcgaac gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca
2761 cgcttcccga agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag
2821 agcgcacgag ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc
2881 gccacctctg acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga
2941 aaaacgccag caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca
3001 tagtcatgcc ccgcgcccac cggaaggagc tgactgggtt gaaggctctc aagggcatcg
3061 gtcgagatcc cggtgcctaa tgagtgagct aacttacatt aattgcgttg cgctcactgc
3121 ccgctttcca gtcgggaaac ctgtcgtgcc agctgcatta atgaatcggc caacgcgcgg
3181 ggagaggcgg tttgcgtatt gggcgccagg gtggtttttc ttttcaccag tgagacgggc
3241 aacagctgat tgcccttcac cgcctggccc tgagagagtt gcagcaagcg gtccacgctg
3301 gtttgcccca gcaggcgaaa atcctgtttg atggtggtta acggcgggat ataacatgag
3361 ctgtcttcgg tatcgtcgta tcccactacc gagatatccg caccaacgcg cagcccggac
3421 tcggtaatgg cgcgcattgc gcccagcgcc atctgatcgt tggcaaccag catcgcagtg
3481 ggaacgatgc cctcattcag catttgcatg gtttgttgaa aaccggacat ggcactccag
3541 tcgccttccc gttccgctat cggctgaatt tgattgcgag tgagatattt atgccagcca
3601 gccagacgca gacgcgccga gacagaactt aatgggcccg ctaacagcgc gatttgctgg
3661 tgacccaatg cgaccagatg ctccacgccc agtcgcgtac cgtcttcatg ggagaaaata
3721 atactgttga tgggtgtctg gtcagagaca tcaagaaata acgccggaac attagtgcag
3781 gcagcttcca cagcaatggc atcctggtca tccagcggat agttaatgat cagcccactg
3841 acgcgttgcg cgagaagatt gtgcaccgcc gctttacagg cttcgacgcc gcttcgttct
3901 accatcgaca ccaccacgct ggcacccagt tgatcggcgc gagatttaat cgccgcgaca
3961 atttgcgacg gcgcgtgcag ggccagactg gaggtggcaa cgccaatcag caacgactgt
4021 ttgcccgcca gttgttgtgc cacgcggttg ggaatgtaat tcagctccgc catcgccgct
4081 tccacttttt cccgcgtttt cgcagaaacg tggctggcct ggttcaccac gcgggaaacg
4141 gtctgataag agacaccggc atactctgcg acatcgtata acgttactgg tttcacattc
4201 accaccctga attgactctc ttccgggcgc tatcatgcca taccgcgaaa ggttttgcgc
4261 cattcgatgg tgtccgggat ctcgacgctc tcccttatgc gactcctgca ttaggaagca
4321 gcccagtagt aggttgaggc cgttgagcac cgccgccgc
//